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羅漢果干果多糖的分離純化、結構表征及其體外免疫調節(jié)活性
來源:導入 閱讀量: 357 發(fā)表時間: 2025-02-18
作者: 張巧鈴,蔣小華,張潔,盧鳳來,韋玉璐,劉宏偉,宋靜茹
關鍵詞: 羅漢果;多糖;純化;結構表征;免疫調節(jié)
摘要:

探究羅漢果干果多糖(Siraitia grosuenorii polysaccharide,SGP)的結構及其免疫調節(jié)活性。利用水提醇沉的方法從羅漢果干果中提取粗多糖,進一步經(jīng)Cellulose DE-52和Sephadex G-200柱分離純化獲得均一多糖組分SGP-C2和SGP-D1。采用PMP柱前衍生及配備有示差折光檢測器的高效液相色譜系統(tǒng)測定其單糖組成和分子質量,并通過紅外光譜與核磁共振對其結構進一步表征。采用中性紅比色法檢測SGP-C2和SGP-D1對RAW264.7細胞的吞噬活性,熒光探針DCFH-DA試劑檢測其活性氧(reactive oxygen species,ROS)的釋放,Griess法檢測其NO生成以及利用酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒檢測其對腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor,TNF)-α與白細胞介素-6(interleukin-6,IL-6)分泌水平的影響。SGP-C2和SGP-D1是由葡萄糖醛酸、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖(galactose,Gal)、阿拉伯糖組成的雜多糖,其單糖物質的量之比分別為0.78∶1.84∶26.57∶1.31∶0.49∶0.06和1.37∶2.00∶20.79∶0.61∶0.12∶0.25,分子質量分別為5.0×105 Da和7.6×105 Da。核磁共振譜圖顯示SGP-C2主鏈結構為→4)-α-D-GalpA-(1→和→4)-α-D-GalpAMe-(1→,而SGP-D1主鏈結構為→4)-α-D-GalpA-(1→。同時,6.25~25 μg/mL質量濃度范圍的SGP-C2和SGP-D1具有促進巨噬細胞吞噬、NO生成、TNF-α和IL-6分泌的作用,SGP-D1還具有促進ROS釋放的活性。結果表明,羅漢果多糖SGP-C2和SGP-D1具有體外免疫調控活性,為羅漢果多糖資源的開發(fā)利用提供了科學依據(jù)和技術路線。

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