
為實現肉制品中大鼠和小鼠源性成分的同步檢測,基于實時熒光重組酶輔助擴增(real-time recombinaseaided amplification,Rt-RAA)技術,以大鼠COX3基因和小鼠16S rRNA基因序列保守區(qū)域為靶標,分別設計相應的Rt-RAA引物和探針,通過反應參數的優(yōu)化確定最佳雙重Rt-RAA檢測反應條件。進一步對建立的雙重Rt-RAA檢測方法進行特異性、靈敏度及穩(wěn)定性評估,并應用該方法對模擬市售肉制品進行檢測。結果表明,所建立的雙重Rt-RAA檢測方法特異性強、穩(wěn)定性好,大鼠和小鼠源性成分的檢出限分別為0.5%和0.2%,同步檢測2 種源性成分檢出限為0.5%,同步檢測混合模擬市售樣品檢出限仍低至0.5%,雙重Rt-RAA與實時熒光定量聚合酶鏈式反應對市售樣品和模擬樣品檢測結果高度一致。因此,本研究建立的雙重Rt-RAA檢測方法適用于大鼠和小鼠源性成分的檢測,為肉制品摻假檢測提供了一種快捷、高效及準確的新方法。
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