領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
將疊氮溴化丙錠（propidium monoazide，PMA）、羥基萘酚藍(lán)（hydroxynaphthol blue，HNB）與環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（loop-mediated isothermal amplification，LAMP）技術(shù)相結(jié)合，建立一種可視化PMA-HNB-LAMP方法快速檢測(cè)畜禽肉中單核細(xì)胞李斯特菌（Listeria monocytogenes）。結(jié)果表明，當(dāng)PMA終質(zhì)量濃度為5.0 μg/mL、孵育和曝光時(shí)間均為15 min時(shí)，可有效抑制105 CFU/mL的單核細(xì)胞李斯特菌死菌DNA的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增，而對(duì)活菌DNA的擴(kuò)增不具有抑制作用。LAMP反應(yīng)體系中HNB終濃度為210 μmol/L時(shí)，檢測(cè)顯色結(jié)果肉眼可見(jiàn)。該方法的純菌液靈敏度為2.4×102 CFU/mL，人工污染肉制品的檢出限為2.3×104 CFU/ mL。分別采用國(guó)標(biāo)法、PMA-HNB-LAMP法和HNB-LAMP法檢測(cè)20 份市售畜禽肉樣，3 種方法的單核細(xì)胞李斯特菌檢出率分別為5%、10%和20%。PMA-HNB-LAMP法在一定程度上可解決LAMP法的假陽(yáng)性問(wèn)題，并且具有操作簡(jiǎn)單、可視性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)。
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