領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
目的：對牛糞及牛肉中的非O157大腸桿菌進(jìn)行分離、鑒定和毒力基因攜帶情況進(jìn)行檢測，以了解非O157大腸桿菌的污染狀況。方法：參考USDA檢測方法，對樣品進(jìn)行選擇性增菌，用多重聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）方法進(jìn)行初步篩選，檢測O抗原（O157、O121、O111、O103、O26），陽性樣本用選擇性顯色培養(yǎng)基rainbow agar分離純化，可疑菌株用多重PCR方法鑒定O抗原，PCR-限制性片段長度多態(tài)性鑒定H抗原，并采用血清凝集實驗進(jìn)行驗證，確認(rèn)的陽性菌株采用多重PCR方法進(jìn)行毒力基因（stx1、stx2、eae、hly）檢測。結(jié)果：在153?份牛糞和49?份牛肉樣本中，共40?份樣品檢出1?個或多個O血清型陽性，牛糞檢出率高于牛肉，非O157陽性率為19.3%，O157的陽性率為0.50%；經(jīng)分離純化后，共鑒定出陽性菌株30?株，其中O26最多占73.3%，O121、O103、O157分別占16.7%、6.7%、3.3%。毒力基因檢測結(jié)果顯示，分離自牛肉的2?株O26:H11，一株stx1、hly陽性，另一株hly陽性，分離自牛糞的1?株O26:H11攜帶hly基因，因此30?株菌株中帶毒菌株陽性率為10.0%，非O157產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌陽性率為3.4%。結(jié)論：牛糞和牛肉中非O157大腸桿菌的污染率明顯高于O157，尤其是O26:H11血清型最高，且檢出含志賀毒素基因的大腸桿菌，這提示零售牛肉市場存在非O157大腸桿菌污染的安全風(fēng)險，我國應(yīng)該加強對非O157大腸桿菌的檢測和監(jiān)控。??
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