領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
為快速檢測(cè)狗源性成分，針對(duì)cytb基因保守區(qū)域設(shè)計(jì)3 對(duì)重組酶輔助擴(kuò)增（recombinase aided amplification，RAA）引物和1 條核酸外切酶（exonuclease，exo）探針，通過(guò)引物和探針濃度的篩選，構(gòu)建一種實(shí)時(shí)RAA（real-time RAA，Rt-RAA）方法。利用交叉反應(yīng)和重復(fù)性實(shí)驗(yàn)對(duì)該檢測(cè)方法的特異性和穩(wěn)定性進(jìn)行評(píng)估，并將Rt-RAA方法靈敏度以及對(duì)混合模擬樣品和市售樣品的檢測(cè)結(jié)果與相應(yīng)的國(guó)標(biāo)檢測(cè)方法進(jìn)行對(duì)比。結(jié)果表明，Rt-RAA檢測(cè)方法特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好，在30 min內(nèi)可檢測(cè)到目的序列，對(duì)狗源性成分的檢出限為0.2%，明顯優(yōu)于實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)方法，應(yīng)用Rt-RAA方法與國(guó)標(biāo)方法對(duì)模擬樣品和市售實(shí)際樣品檢測(cè)結(jié)果完全一致。因此，本研究建立的Rt-RAA檢測(cè)方法適用于狗源性成分的檢測(cè)，為肉源性成分鑒定提供了另一種快速、準(zhǔn)確的新方法。
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