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—— 中國食品雜志社
以rpoA基因為靶基因，建立綠色魏斯氏菌SYBR Green Ⅰ實時熒光定量聚合酶鏈式反應（polymerase chain reaction，PCR）快速檢測方法。針對rpoA基因設(shè)計特異性引物，建立綠色魏斯氏菌實時熒光定量PCR檢測體系，通過特異性、靈敏度和重復性實驗評價體系的檢測效果，同時與常規(guī)PCR方法進行比較。結(jié)果表明：實時熒光定量PCR方法能夠特異性檢出綠色魏斯氏菌，對基因組DNA的檢測靈敏度達到2.667×10－3 pg/μL，對純培養(yǎng)物和模擬污染牛肉樣品直接檢測的靈敏度分別為30 CFU/mL和0.8 CFU/g；與常規(guī)PCR相比，實時熒光定量PCR檢測的靈敏度是其1 000 倍；不同濃度樣品獨立重復實驗循環(huán)閾值的標準差均小于1，變異系數(shù)在0.02%～1.28%之間。本研究所建立的綠色魏斯氏菌實時熒光定量PCR檢測方法具有特異性好、靈敏度高、重復性好的特點，能夠進行準確的定量檢測，是快速檢測綠色魏斯氏菌的有效手段。
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