領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
為建立食品中Escherichia coli O157:H7的微滴數(shù)字聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（droplet digital polymerase chain reaction，ddPCR）快速定量檢測方法，針對E. coli O157:H7的特異性單拷貝基因hlyA設(shè)計(jì)引物探針，并進(jìn)行特異性、靈敏度和重復(fù)性實(shí)驗(yàn)，同時(shí)通過人工污染三文魚樣品的檢測，比較平板計(jì)數(shù)法、real-time PCR和ddPCR方法的測定值效果。結(jié)果表明，所建立的E. coli O157:H7 ddPCR檢測方法具有良好的特異性、靈敏性和重復(fù)性。細(xì)菌純培養(yǎng)液中定量限為105 CFU/mL，檢出限為25 CFU/mL，人工污染三文魚樣品中檢出限為110 CFU/g。對不同人工污染水平的三文魚樣品，ddPCR與平板計(jì)數(shù)的測定值結(jié)果無顯著性差異（P＞0.05），比real-time PCR方法的測定值結(jié)果更加穩(wěn)定、準(zhǔn)確。因此，本研究建立的ddPCR方法能夠更加快速、準(zhǔn)確、靈敏、特異地絕對定量檢測食品中E. coli O157:H7。
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