
目的:建立一種基于線性回文脫氧核酶(DNAzyme)的快速檢測方法,用于檢測茶葉中重金屬鉛離子,以滿足實(shí)際樣品現(xiàn)場快速檢測的需求。方法:設(shè)計并構(gòu)建具備鉛離子識別能力的特異性DNAzyme,并在其酶鏈兩端引入回文序列以誘導(dǎo)線性組裝,從而增強(qiáng)其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性和提高識別效率。酶鏈與底物鏈分別標(biāo)記BHQ1和FAM,構(gòu)建熒光響應(yīng)體系;通過優(yōu)化酶鏈與底物鏈濃度、反應(yīng)時間等關(guān)鍵參數(shù)以確定最優(yōu)實(shí)驗條件。結(jié)果:該方法在最優(yōu)的條件下對鉛離子表現(xiàn)出優(yōu)異的選擇性和靈敏度,檢測限低至0.012 nmol/L,將該方法應(yīng)用于茶湯樣本中,加標(biāo)回收率在96.05%~100.41%之間,表明該檢測體系在復(fù)雜樣品基質(zhì)中具有良好的適用性和可靠性。結(jié)論:本研究開發(fā)的線性回文DNAzyme檢測方法具有操作簡便、檢測快速、選擇性強(qiáng)和靈敏度高等優(yōu)點(diǎn),能夠有效應(yīng)用于茶葉等實(shí)際樣品中鉛離子的快速檢測,可為食品安全監(jiān)測提供一種高效、實(shí)用的新策略。
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