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TaqMan探針實時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測低溫酸乳中常見的霉菌和酵母
來源:導(dǎo)入 閱讀量: 221 發(fā)表時間: 2024-11-06
作者: 張捷,陳勃旭,杜海寬,張子侖,嚴陶陶,陳佳,周巍
關(guān)鍵詞: TaqMan探針;霉菌;酵母;實時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng);低溫酸乳
摘要:

為提高低溫酸乳中霉菌和酵母菌檢測效率,根據(jù)保守基因延伸因子1α(elongation factor 1α,EF-1α)序列分別針對霉菌與酵母菌設(shè)計引物與探針,利用實時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),基于TaqMan探針分別建立霉菌和酵母菌檢測方法。以低溫酸乳中常見真菌與乳酸菌基因組DNA為擴增模板進行特異性檢驗,并對方法靈敏度與重復(fù)性進行檢驗,同時構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明:根據(jù)EF-1α基因設(shè)計的引物與探針特異性良好;所構(gòu)建的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)均大于0.99;該方法檢測酵母菌的靈敏度為101?CFU/mL,檢測霉菌的靈敏度為102?CFU/mL;重復(fù)性檢驗中組內(nèi)與組間的變異系數(shù)均小于2%,表明方法具有良好的可靠性與穩(wěn)定性,適用于低溫酸乳中霉菌與酵母菌的快速檢測。

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