采用水溶劑法提取昆侖胎菊水溶性黃酮(water-soluble flavonoids from Coreopsis tinctoria buds,CBF)。在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,以提取液中總黃酮提取量為指標(biāo),響應(yīng)面法優(yōu)化得到CBF提取最優(yōu)工藝:水提時間15 min、水提溫度96 ℃、液料比71∶1(mL/g),在此條件下水溶性總黃酮提取量可達(dá)到145.45 mg/g。探討CBF對D-半乳糖致衰老小鼠的抗衰老作用及其對衰老小鼠肝組織中沉默信息調(diào)節(jié)因子1(silent information regulator 1,SIRT1)、p53蛋白表達(dá)的影響。以長期皮下注射D-半乳糖(300 mg/(kg?d))建立衰老小鼠模型,連續(xù)造模45 d,建模的同時分別灌胃VE(50 mg/(kg?d))、CBF(180、700 mg/(kg?d)),觀察各組小鼠體質(zhì)量變化及行為學(xué)狀態(tài),HE染色法觀測肝組織病理形態(tài)學(xué)變化,并采用免疫印跡法評價衰老小鼠肝組織中SIRT1、p53蛋白的表達(dá)。結(jié)果表明,CBF對小鼠生長發(fā)育無不良影響且可改善衰老小鼠的行為狀況;顯著減輕D-半乳糖引起的肝組織病理學(xué)損傷;顯著提升衰老小鼠肝組織中SIRT1蛋白表達(dá)(P<0.05),有效抑制D-半乳糖引起的p53蛋白過量表達(dá)(P<0.05)。結(jié)論:響應(yīng)面法建立的回歸數(shù)據(jù)模型優(yōu)化得到的CBF水提取工藝條件實(shí)際有效,同時發(fā)現(xiàn)CBF具有良好的抗衰老作用,其作用機(jī)理可能與激活SIRT1/p53信號通路有關(guān)。
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