
建立高效膠束電動毛細管色譜耦合二極管陣列檢測器(micellar electrokinetic capillary chromatography- diode array detector,MECC-DAD)檢測牛乳中痕量黃曲霉毒素的新方法,采用高效液相色譜-熒光檢測器(high performance liquid chromatography-fluorescence detector,HPLC-FLD)法及MECC-DAD法檢測牛乳樣品中5 種黃曲霉毒素的殘留量,考察2 種檢測技術(shù)的特異性。牛乳樣品經(jīng)免疫親和柱凈化后,MECC-DAD法采用未涂層熔融石英毛細管柱進行分離,以7.5 mmol/L四硼酸鈉、30 mmol/L十二烷基磺酸鈉及體積分數(shù)5%乙腈體積比1∶1∶1的混合液(pH 8.5)為緩沖液,檢測波長為214 nm;HPLC-FLD法采用C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm)進行分離,乙腈-水為流動相進行梯度洗脫,熒光檢測器激發(fā)波長360 nm、發(fā)射波長440 nm。結(jié)果表明:MECC-DAD法的色譜圖峰形更對稱、平滑、尖銳,無拖尾現(xiàn)象;MECC-DAD和HPLC-FLD法的檢出限分別為0.182~1.669、0.014~0.058 μg/L,MECC-DAD法的檢出限雖高于HPLC-FLD法,但也能滿足牛乳中黃曲霉毒素的測定要求;HPLC-FLD法的精密度稍高于MECC-DAD法;MECC-DAD法的加標回收率為80.3%~137.0%,HPLC-FLD法的加標回收率為79.6%~134.0%,二者相當;2 種方法對市售牛乳樣品的定量檢測結(jié)果偏差為P=0.900>0.05,沒有顯著性差異。MECC-DAD法分離快速、高效、經(jīng)濟,更適合牛乳樣品中黃曲霉毒素殘留量的檢測。
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