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響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化動(dòng)物源性食品中呋喃西林代謝物ELISA檢測(cè)的衍生條件
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 360 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 彭宏威,白瑞櫻,陳 殿,孫遠(yuǎn)明,徐振林,曾道平,李 段,伍志權(quán),楊金易
關(guān)鍵詞: 呋喃西林代謝物|衍生條件|響應(yīng)面法|動(dòng)物源性食品|酶聯(lián)免疫吸附法
摘要:

利用響應(yīng)面法優(yōu)化酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)檢測(cè)呋喃西林代謝物前處理的衍生條件。根據(jù)Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理,在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,以呋喃西林代謝物回收率為響應(yīng)值,應(yīng)用響應(yīng)面分析法研究衍生劑體積、衍生劑濃度、衍生溫度和衍生時(shí)間各因素間的交互作用及對(duì)呋喃西林代謝物回收率的影響。最終確定ELISA方法線性檢測(cè)范圍為0.13~10.51 ng/mL,IC50為1.17 ng/mL;在選取樣品質(zhì)量為2 g時(shí),最佳衍生條件為衍生劑體積415 μL、衍生劑濃度15 mmol/L、衍生溫度57 ℃、衍生時(shí)間50 min,實(shí)際回收率為98.57%~103.76%;衍生產(chǎn)物與呋喃西林原藥交叉反應(yīng)率為7.63%,與其他結(jié)構(gòu)類似物、功能類似物及衍生劑交叉反應(yīng)率均小于0.17%;加標(biāo)回收率為93.45%~103.21%,批內(nèi)變異系數(shù)為1.86%~6.15%,批間變異系數(shù)為3.88%~8.84%。該衍生條件高效,檢測(cè)方法準(zhǔn)確可靠,適用于動(dòng)物源性食品中呋喃西林代謝物的快速篩查。

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