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基于DNA核酸適配體序列的超靈敏比色法檢測(cè)牛乳中的雌二醇
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 341 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 付 田,曹錦軒,潘道東,,程克文,曾小群,吳 振,孫楊贏
關(guān)鍵詞: 雌二醇;膠體金;DNA核酸適配體;比色法
摘要:

分別利用最適長(zhǎng)度的雌二醇DNA核酸適配體的特異性識(shí)別和膠體金聚集前后顏色及吸光度的變化實(shí)現(xiàn)雌二醇的定性和定量檢測(cè)。本研究制備了膠體金,并設(shè)計(jì)了75-mer、35-mer和22-mer的雌二醇核酸適配體,依據(jù)沒(méi)有核酸適配體保護(hù)的膠體金在最適氯化鈉濃度條件下聚集,而有核酸適配體保護(hù)的膠體金在此濃度條件下不聚集以及雌二醇的核酸適配體與雌二醇特異性結(jié)合的特性,實(shí)現(xiàn)對(duì)雌二醇的超靈敏檢測(cè)。結(jié)果表明,在NaCl濃度30 mmol/L、35-mer核酸適配體質(zhì)量濃度30 nmol/L條件下,雌二醇質(zhì)量濃度與膠體金在625 nm和523 nm波長(zhǎng)條件下,吸光度的比值(A625 nm/A523 nm)在13.6~54.4 pg/mL的范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,檢測(cè)限為2.7 pg/mL。所構(gòu)建的比色法的特異性、穩(wěn)定性和重復(fù)性均良好。應(yīng)用該方法對(duì)牛乳樣品進(jìn)行檢測(cè),雌二醇的最低檢測(cè)限為13.6 pg/mL,因此可用于奶制品中雌二醇的快速檢測(cè)。

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