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毛柄金錢菌gpd啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)福壽螺纖維素酶基因在灰蓋鬼傘菌中的表達(dá)
來源：食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 255 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 楊培周，郭麗瓊，林俊芳
關(guān)鍵詞: 纖維素酶基因|福壽螺|毛柄金錢菌|gpd啟動(dòng)子
摘要:

為研究毛柄金錢菌gpd啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)福壽螺纖維素酶基因(mfc)在大型絲狀真菌中的表達(dá)效果，本實(shí)驗(yàn)通過構(gòu)建毛柄金錢菌gpd啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的mfc基因的真核表達(dá)載體，采用PEG(polyethylene glycol)介導(dǎo)法將目的基因重組進(jìn)色氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型灰蓋鬼傘菌染色體，對(duì)轉(zhuǎn)化子進(jìn)行PCR、Southern blotting、RT-PCR等分子鑒定，通過測(cè)定濾紙酶、CMC酶和木聚糖酶的活力考察mfc的表達(dá)效果。結(jié)果表明：多功能纖維素酶基因整合入灰蓋鬼傘基因組中，毛柄金錢菌gpd啟動(dòng)子能夠高效驅(qū)動(dòng)mfc基因的表達(dá)，其中酶活力最高的工程菌株為Cfvlm9，其濾紙酶活力、CMC酶活力和木聚糖酶活力分別為21.5、44、235U/mL，分別是對(duì)照的1.79倍、1.6倍和2.97倍。

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