領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
建立一種微滴式數(shù)字聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（droplet digital polymerase chain reaction，ddPCR）定量檢測(cè)發(fā)酵乳中醋化醋桿菌的技術(shù)。根據(jù)醋化醋桿菌ITS基因序列設(shè)計(jì)特異性引物和探針，通過(guò)反應(yīng)溫度篩選優(yōu)化ddPCR擴(kuò)增條件，通過(guò)多種菌株擴(kuò)增驗(yàn)證方法特異性，通過(guò)人工添加醋化醋桿菌驗(yàn)證方法檢出限，通過(guò)ddPCR法實(shí)測(cè)結(jié)果和計(jì)數(shù)法測(cè)定結(jié)果之間的比較對(duì)其絕對(duì)定量進(jìn)行系統(tǒng)性研究。結(jié)果表明：建立的發(fā)酵乳中醋化醋桿菌ddPCR定量檢測(cè)方法，反應(yīng)條件中最適退火溫度為54.6?℃，方法特異性強(qiáng)，檢出限為7.2×101?CFU/mL，靈敏度高，定量偏差率為23.73%。該方法可以滿足發(fā)酵乳中醋化醋桿菌定量檢測(cè)需求。
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